Amplite试剂盒（AAT Bioquest开发）是一系列基于荧光法或比色法的检测试剂盒，适用于多种生物分子和生化反应的定量分析。

一、Amplite™ 试剂盒的核心优势

高灵敏度与宽动态范围

荧光法检测限低至 nM~pM级（如ATP检测灵敏度达0.1 nM），适合微量样本（如原代细胞、微量体液）。

比色法线性范围宽，适用于高浓度样本（如培养基中的葡萄糖）。

操作简便

•“Mix-and-Read” 设计：无需复杂步骤，多数试剂盒仅需一步孵育（10~30分钟）。

• 兼容高通量筛选（HTS），适合96/384孔板自动化检测。

优异的抗干扰能力

• 专利荧光染料（如 Resorufin、DDAO）可减少样本自发荧光干扰，提高信噪比。

• 部分试剂盒含内参校正（如双波长检测），适用于复杂样本（血清、组织匀浆）。

灵活适配性

• 提供荧光（Ex/Em 可调）和 比色（可见光检测）双平台选择，匹配不同实验室设备。

• 与哺乳动物细胞、细菌、植物样本兼容，且无需毒性溶剂（如DMSO）。

稳定性强

• 试剂预混优化，常温运输，4℃保存期长达6个月。

二、Amplite™ 试剂盒的主要应用范围

1. 氧化应激与抗氧化研究

检测目标：H₂O₂、超氧阴离子（O₂⁻）、总ROS、抗氧化剂（如GSH）。

应用场景：

• 神经退行性疾病（如阿尔茨海默症）中的氧化损伤机制。

• 药物/天然产物的抗氧化能力评价（如筛选抗衰老化合物）。

2. 能量代谢监测

检测目标：ATP、葡萄糖、乳酸、NAD+/NADH。

应用场景：

• 肿瘤细胞糖酵解（Warburg效应）研究。

• 线粒体功能异常相关疾病（如糖尿病、代谢综合征）。

3. 细胞功能分析

检测目标：细胞活力、凋亡、增殖（如LDH、蛋白酶活性）。

应用场景：

• 抗癌药物毒性筛选（结合IC50计算）。

• 免疫细胞激活状态评估（如T细胞耗竭模型）。

4. 酶学与信号通路研究

检测目标：激酶、磷酸酶、蛋白酶（如Caspase-3）、乙酰胆碱酯酶。

应用场景：

• 激酶抑制剂开发（如EGFR、MAPK通路药物筛选）。

• 神经递质代谢调控（如乙酰胆碱降解速率检测）。

5. 微生物与感染研究

检测目标：细菌生物膜、β-内酰胺酶活性、硝酸还原酶。

应用场景：

• 抗生素耐药性机制研究。

• 益生菌代谢活性分析。

三、常见类型以及应用场景

1. 活性氧（ROS）与氧化应激检测

适用试剂盒

Amplite™ Fluorimetric Hydrogen Peroxide (H₂O₂) Assay Kit（荧光法检测过氧化氢）

Amplite™ Colorimetric Total ROS Assay Kit（比色法检测总活性氧）

应用

• 氧化应激研究（如细胞凋亡、炎症）

• 抗氧化剂活性评价（如药物筛选）

2. 葡萄糖代谢检测

适用试剂盒

Amplite™ Fluorimetric Glucose Assay Kit（荧光法，高灵敏度）

Amplite™ Colorimetric Glucose Assay Kit（比色法，适用于常规检测）

应用

• 细胞/培养基中葡萄糖消耗监测

• 糖尿病研究或糖代谢相关酶活性分析

3. 细胞活力与增殖检测

适用试剂盒

Amplite™ Fluorimetric ATP Assay Kit（通过ATP含量间接反映细胞活力）

Amplite™ Cell Viability Kits（基于荧光信号）

应用

• 药物毒性测试

• 肿瘤细胞增殖研究

4. 酶活性检测适用试剂盒

Amplite™ Fluorimetric Protease Assay Kit（蛋白酶活性）

Amplite™ Phosphatase/Alkaline Phosphatase (ALP) Assay Kits（磷酸酶/ALP活性）

应用

• 酶抑制剂筛选（如激酶、水解酶）

• 信号通路研究（如磷酸化/去磷酸化）

图示

图为使用NOVOstar酶标仪（BMG Labtech），在具有Amplite 荧光马来酰亚胺定量测定试剂盒的96孔板（黑色）中测量N-乙基马来酰亚胺剂量响应。